Bộ phim Tình Chị Duyên Em đưa khán giả trở về năm 1999, thời điểm thế giới đang hồi hộp đón chờ thiên niên kỷ mới cùng cặp chị em sinh đôi You và Me. Vốn là hai tâm hồn đồng điệu, họ gắn bó mật thiết và chia sẻ với nhau mọi khía cạnh trong cuộc sống thường nhật.
Sự xuất hiện bất ngờ của chàng trai tên Mark đã tạo nên một bước ngoặt lớn, khiến hai chị em lần đầu đối mặt với tình yêu đầu đời không thể sẻ chia. Trước thử thách đầy cảm xúc này, những xung đột nội tâm đã dẫn dắt You và Me bước vào một giai đoạn trưởng thành hoàn toàn mới.